【摘 要】
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目的 用聚合纳米金棒标记的巯基化旋毛虫排泄分泌抗原构建旋毛虫感染早期敏感的诊断方法.方法 制备旋毛虫成虫、新生幼虫、囊包幼虫的粗抗原和纯化抗原,以及肌幼虫排泄分泌抗原.优化金晶种子生长法中的十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)、抗坏血酸(AA)和硝酸银(AgNO3)的用量,制备出长径比稳定的纳米金棒,与不同浓度(10、20、30、40、50μg/ml)巯基化的旋毛虫排泄分泌抗原、虫体粗抗原以及虫体纯化抗原结合进行纳米金棒的功能化,通过观察紫外分光扫描表面等离子共振吸收峰的变化,筛选标记的最适浓度和诊断抗原.用
【机 构】
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大理大学基础医学院,大理671000;威海市卫生学校,威海264400;建德市第一人民医院,杭州311600;大理大学临床医学院,大理671000
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目的 用聚合纳米金棒标记的巯基化旋毛虫排泄分泌抗原构建旋毛虫感染早期敏感的诊断方法.方法 制备旋毛虫成虫、新生幼虫、囊包幼虫的粗抗原和纯化抗原,以及肌幼虫排泄分泌抗原.优化金晶种子生长法中的十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)、抗坏血酸(AA)和硝酸银(AgNO3)的用量,制备出长径比稳定的纳米金棒,与不同浓度(10、20、30、40、50μg/ml)巯基化的旋毛虫排泄分泌抗原、虫体粗抗原以及虫体纯化抗原结合进行纳米金棒的功能化,通过观察紫外分光扫描表面等离子共振吸收峰的变化,筛选标记的最适浓度和诊断抗原.用纳米金棒标记最适诊断抗原,分别检测不同囊包幼虫感染度(轻、中、重度分别感染50、100、300条/鼠)小鼠感染后5、8、11、17、23 d的血清抗体以及重度感染的小鼠不同血清稀释度(1∶300、1∶400、1∶500、1∶600、1∶700、1∶800)的血清抗体情况,并与包被最适诊断抗原的ELISA法检测结果进行评价性比较,判定其检测早期低虫荷时的敏感性.结果 11.875 ml 0.2 mol/L CTAB、160μl 100 mmol/L AA和150μl 10 mmol/L AgNO3制备出的纳米金棒径长比最长,溶液最稳定.用纳米金棒标记的不同浓度旋毛虫粗抗原、纯化抗原以及排泄分泌抗原,紫外分光光度计光谱显示表面等离子共振吸收峰位移最大值为87 nm,最适包被抗原为排泄分泌抗原.用纳米金棒标记的旋毛虫肌幼虫排泄分泌抗原能检出轻度、中度、重度感染囊包幼虫后5d小鼠的血清抗体以及稀释度为1∶800的阳性血清抗体.ELISA法能检出轻度和中度感染囊包幼虫后11d小鼠的血清抗体和重度感染囊包幼虫后8d小鼠的血清抗体以及稀释度为1∶600的阳性血清抗体.结论 纳米金棒能够有效标记旋毛虫抗原,排泄分泌抗原功能化的纳米金棒对旋毛虫早期感染及低虫荷的诊断具有明显优势.
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患者,女,38岁,专业技术人员,上海市嘉定区人,2014年2月前往喀麦隆工作,偶尔归国探亲,自2019年9月后未归国.2021年3月14日患者因乏力、味觉减退,鼻、咽拭子新型冠状病毒(简称新冠病毒)核酸阳性,于喀麦隆新冠肺炎接管中心治疗,具体用药不详.3月20日复查新冠病毒核酸阴性,出院后居家隔离,3月29日、5月17日、6月8日、6月9日复查新冠病毒核酸均为阴性.6月16日抵达杭州,经机场海关采样进行新冠病毒核酸检测,于隔离酒店隔离,核酸结果尚未出,送隔离酒店前体温均为正常.
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患者,男,56岁,云南西双版纳人,农民.入院前2年无明显诱因出现全身多关节疼痛,伴晨僵约半小时;入院前10个月前诊断为“类风湿性关节炎”,开始规律口服泼尼松(10 mg/次,2次/日)治疗.入院前6个月无明显诱因出现双肩关节活动受限,不能抬举,双下肢肢体无力,活动后胸闷、气促,活动减少;进食哽噎感,进食后腹胀;大便干结,偶有便秘;额顶部出现大量密集痤疮,胸部出现片状红斑,双手尺侧、腰背部、肛周出现红色皮疹.
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