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本试验以原代培养鲤鱼肠上皮细胞为研究模型,研究了大豆中主要抗营养因子之一——大豆凝集素(SBA)对鲤鱼肠上皮细胞增殖分化及代谢的影响。通过细胞形态观察、培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活力、谷丙转氨酶(GPT)活力、谷草转氨酶(GOT)活力等指标考察研究大豆凝集素对原代培养鲤鱼肠上皮细胞结构完整性的影响;通过考察细胞MTT OD值、蛋白质含量、碱性磷酸酶(AKP)活力、Na+-K+-ATP酶活力等指标研究大豆凝集素对鲤鱼肠上皮细胞增殖分化及凋亡的影响;通过考察细胞中GPT活力、GOT活力、Na+-K+-ATP酶活力、细胞及培养液中蛋白质含量变化、培养液氨含量等指标探索大豆凝集素对原代培养鲤鱼肠上皮细胞蛋白质代谢的影响。 试验结果表明:SBA对原代培养鲤鱼肠上皮细胞培养液中LDH活力、培养液GPT活力有极显著影响(P<0.01),培养液LDH活力、培养液GPT活力分别与SBA含量呈极显著的线性关系,y1=115.515+0.787x(R2=0.9140,P<0.01);y2=3.6807+0.0247x(R2=0.8720,P<0.01)(其中y1、y2分别为培养液中LDH活力和GPT活力,x为培养液中SBA含量),但对培养液GOT活力影响不显著(P>0.05)。培养液中LDH活力分别与SBA含量、细胞GPT活力、培养液GPT活力呈极显著的正相关(r1=+0.9560,P<0.01;r2=+0.9690,P<0.01;r3=+0.9260,P<0.01)。同时SBA显著(P<0.05)或者极显著(P<0.01)增加细胞MTT OD值、蛋白质含量/孔;极显著降低细胞AKP活力、Na+-K+-ATP酶活力(P<0.01);细胞MTT OD值与SBA含量呈极显著正相关(r=+0.9550,P<0.01),Na+-K+-ATP酶活力/MTT OD与AKP活力/MTTOD值存在极显著正相关(r=+0.9520,P<0.01)。SBA显著或极显著影响细胞蛋白质的沉积率、细胞GPT活力、细胞GOT活力及培养液中氨含量(P<0.05或P<0.01),细胞GPT活力分别与SBA含量、培养液中氨含量呈正相关(r1=+0.9230,P<0.01,r2=+0.7470,P=0.0880),并呈极显著或显著线性关系(y1=14.9238+0.2001x R2=0.8520,P<0.01;y2=1089.414+0.686x R2=0.8260,P<0.05;其中y1、y2分别为细胞GPT活力、培养液中氨含量,x为培养液中SBA含量)。 综合本试验结果表明:在本试验条件下,SBA破坏了鲤鱼肠上皮细胞结构完整性,形态学观察表现为细胞形态失去原有的圆形,变成长条行或不规则,细胞轮廓不清晰等;SBA能够促进鲤鱼肠上皮细胞增殖,降低其分化成熟,并促进其凋亡;同时SBA能够促进鲤鱼肠道上皮细胞蛋白质的沉积和蛋白质脱氨分解。