【摘 要】
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乳房炎是母畜的常见疾病之一,尤其奶牛乳房炎给养殖业带来了严重的经济损失。奶牛临近分娩时,血液中的白细胞减少,尤其是中性粒细胞显著减少是引起奶牛产后感染疾病如子宫内
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乳房炎是母畜的常见疾病之一,尤其奶牛乳房炎给养殖业带来了严重的经济损失。奶牛临近分娩时,血液中的白细胞减少,尤其是中性粒细胞显著减少是引起奶牛产后感染疾病如子宫内膜炎、乳房炎的关键因素之一。粒细胞集落刺激因子(G-CSF)是参与调节骨髓粒系造血的主要细胞因子,能够促进骨髓中粒系祖细胞的增殖、分化,增加外周血的中性粒细胞数量和促进成熟中性粒细胞的游走、吞噬、杀菌能力及对外来物质的粘附。因此,G-CSF可望作为防治围产期奶牛乳房炎等感染性疾病的药物。通过建立小鼠大肠杆菌性乳房炎模型,探讨G-CSF对小鼠大肠杆菌性乳房炎的预防效果。方法:(1)选取泌乳8-10天的初产昆明小鼠24只,随机平均分成4组,与幼鼠隔离2h后, Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组小鼠第四对乳房两侧分别灌注25gL1.5×105CFU/mL1.5×107CFU/mL和1.5×109CFU/mL菌液,ⅣV组灌注等量灭菌生理盐水,建立小鼠大肠杆菌性乳房炎模型。(2)另选取120只泌乳8-10天的初产昆明小鼠,随机平均分为Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、ⅣV组和V组。与幼鼠隔离2h后,Ⅰ、Ⅱ组皮下注射0.1mL生理盐水,Ⅲ、Ⅳ、V组分别按10g/kg、20μg/kg、30μg/kg体重皮下注射0.1mLrhG-CSF;24h后,Ⅰ组第四对乳房灌注50μl(25μL/侧)的生理盐水,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、组灌注含1.5x107CFU/mL大肠杆菌的菌液;在乳房灌注后的0h、24h、72h、120h,每组随机选取6只小鼠进行采样,检测血液生理指标、测定血清中TNF-α含量、乳腺组织大肠杆菌计数及乳腺组织病理学变化。结果:(1)小鼠大肠杆菌乳房炎模型建立:攻菌后24h,与IV组比较,Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组小鼠血清中的TNF-α极显著升高(P<0.01);Ⅱ、Ⅲ组血清中的TNF-αa极显著高于Ⅰ组(P<0.01):Ⅲ组血清中的TNF-α极显著高于Ⅱ组(P<0.01)。Ⅱ组乳腺出现广泛的充血,并伴有出血,乳腺局部红肿、变硬,有淡黄色的炎性渗出物和凝乳块:腺泡腔和小叶间质内嗜中性粒细胞显著增多,上皮细胞脱落、坏死,腺泡结构紊乱与周围组织界限不清,间质充血、出血,呈典型的乳房炎症状:Ⅰ组乳腺病变较Ⅱ组轻微,Ⅲ组乳腺病变较Ⅱ组更严重:Ⅳ组乳腺未见有异常病变。(2)rhG-CSF对小鼠大肠杆菌性乳房炎的保护效果:Ⅲ组小鼠精神不振,食欲轻微降低,被毛稍蓬乱,乳头发红:乳腺充血,稍肿胀;腺泡腔及间质有炎性细胞浸润:0h、24h、72h、120h,Ⅲ组小鼠WBC及GRA均极显著高于Ⅰ组和Ⅱ组(P<0.01),72h-120h有2只小鼠临床症状明显好转。ⅣV组小鼠精神正常,乳房红、肿、痛等临床症状表现较微弱;乳腺轻微充血,无明显肿胀:乳腺组织结构清晰,上皮细胞排列整齐;0h、24h、72h、120h,ⅣV组小鼠WBC及GRA均极显著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组(P<0.01);24h-120h,Ⅳ组有3只小鼠临床症状逐渐消失。V组小鼠精神食欲良好,乳腺组织结构清晰,上皮细胞排列整齐,部分腺泡充满乳汁,无明显的乳房炎引起的组织损伤;0h、24h、72h、120h,V组小鼠的WBC及GRA均极显著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组(P<0.01):至120h,该组小鼠临床症状基本消失。结论:(1)泌乳8-10天的初产昆明小鼠,第四对乳头灌注1.5×107CFU/mL大肠杆菌25ul/侧,可成功构建小鼠乳房炎模型。(2)20μg/kg、30μg/kg体重给予小鼠皮下注射0.1mLrhG-CSF对小鼠急性感染大肠杆菌性乳房炎均具有显著的预防效果。
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