【摘 要】
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克氏原螯虾作为我国重要的淡水经济养殖虾品种,由于水体环境恶化以及不科学的高密度养殖等诸多因素,导致克氏原螯虾病害屡屡发生,养殖业的经济产出受到了巨大影响。研究克氏原螯虾的先天免疫系统的重要意义在于可以完善甲壳动物免疫应答机制,并且对提高其抗病害能力具有重要的实践意义。肿瘤抑制候选基因2（Tumor Suppressor Candidate 2,TUSC2）可以通过调控细胞凋亡从而参与天然免疫应答,
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克氏原螯虾作为我国重要的淡水经济养殖虾品种,由于水体环境恶化以及不科学的高密度养殖等诸多因素,导致克氏原螯虾病害屡屡发生,养殖业的经济产出受到了巨大影响。研究克氏原螯虾的先天免疫系统的重要意义在于可以完善甲壳动物免疫应答机制,并且对提高其抗病害能力具有重要的实践意义。肿瘤抑制候选基因2（Tumor Suppressor Candidate 2,TUSC2）可以通过调控细胞凋亡从而参与天然免疫应答,然而其分子作用机制尚不清楚。本实验克隆了克氏原螯虾的TUSC2基因,并探究了其免疫学功能及作用机理,取得的主要结果如下:1、克隆获得了303 bp的克氏原螯虾TUSC2基因序列,编码100个氨基酸,蛋白预测分子量为11.47 k Da。该蛋白与其他无脊椎动物TUSC2的亲缘关系较近。2、在大肠杆菌中高效表达了TUSC2的融合蛋白,浓度约1mg/ml。并利用纯化的蛋白制备了多克隆抗体（效价为1:6400）。3、从克氏原螯虾血淋巴蛋白中初步筛选鉴定出一个与TUSC2互作的蛋白——血蓝蛋白（Hemocyanin）。4、TUSC2在肝胰腺、肠、肌肉、鳃、心脏、胃、血淋巴等所检各组织中均有表达,其中鳃中表达量最高。5、LPS和poly（I:C）刺激后血淋巴细胞、鳃、肠中TUSC2基因的表达模式有显著变化,且对poly（I:C）的刺激反应更敏感。而TUSC2基因RNA干扰和TUSC2重组蛋白刺激能够显著影响血淋巴细胞、腮中Cyt C、p53、Bcl、BI、Ras、Raf等相关免疫基因的表达水平。
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