【研究背景】:胃癌是世界范围内癌症死亡的第三大常见原因。胃癌治疗后的侵袭和转移仍然是影响其治疗效果的重要阻碍。5-脂氧合酶(5-lipoxygenase,5-LOX)可以增强细胞增殖、迁移和侵袭的能力。上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)被认为是肿瘤转移和侵袭的重要过程。然而,5-LOX对胃癌增殖、迁移和侵袭的作用及机制仍未被系统阐述。【目的】:探讨EphA2在胃癌EMT中的作用及其机制。【方法】:收集临床胃癌组织标本,采用免疫组化检测分析5-LOX在胃癌组织的表达情况及与临床病理特征的关系;采用Kaplan-Meier生存曲线和log-rank检验评价5-LOX对胃癌预后的影响;采用transwell迁移、侵袭实验检测5-LOX对胃癌细胞迁移、侵袭能力的影响;采用蛋白免疫印迹法(western blot)方法探究过表达5-LOX能否介导胃癌细胞促进EMT相关蛋白表达;采用建立裸鼠皮下和腹腔肿瘤模型,研究在体内水平5-LOX对胃癌细胞增殖、转移的影响;采用MAPK/ERK通路抑制剂U0126探究5-LOX介导胃癌细胞发生EMT的潜在机制。【结果】:1.免疫组织化学实验表明,胃癌组织中5-LOX表达显著升高,且与部分临床病理特征有着显著联系。2.Kaplan-Meier生存曲线表明5-LOX能够显著降低胃癌病人的术后生存时间。3.CCK-8细胞增殖实验表明,过表达5-LOX胃癌细胞的OD值显著高于对照组,沉默5-LOX胃癌细胞的OD值显著低于对照组;transwell迁移、侵袭实验表明,过表达5-LOX的胃癌细胞迁移、侵袭通过transwell小室的细胞数量显著高于对照组,沉默5-LOX的胃癌细胞迁移、侵袭通过transwell小室的细胞数量显著低于对照组。4.Western blot及免疫荧光实验结果表明,和对照组相比,过表达5-LOX的胃癌细胞E-cadherin蛋白表达显著降低,N-cadherin、p-ERK表达显著升高;和对照组相比,沉默5-LOX的胃癌细胞E-cadherin蛋白表达显著升高,N-cadherin、p-ERK表达显著降低。5.裸鼠皮下及腹腔成瘤实验表明,5-LOX组的皮下肿瘤体积与重量显著大于对照组;5-LOX组腹腔、肠系膜、肝脏底部转移瘤显著多于对照组,5-LOX组腹水显著多于对照组。6.Western blot实验表明,和过表达5-LOX组的胃癌细胞相比,使用U0126处理的胃癌细胞,E-cadherin蛋白表达显著上调,N-cadherin表达水平显著下调。【结论】:1.胃癌组织中5-LOX表达显著增加,与胃癌患者的不良预后相关。2.5-LOX能够促进胃癌细胞发生EMT。3.5-LOX是通过激活MAPK/ERK通路促进胃癌细胞发生EMT。