芳香中药草果中萜类成分及生物活性研究

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萜类化合物是植物体内重要的次生代谢产物之一,具有丰富的骨架类型和多样的生物活性。姜科(Zingiberaceae)豆蔻属(Amomum)植物资源丰富,富含结构新颖且活性显著的萜类成分。豆蔻属植物多为香料,具有“芳香开窍”之功效,可用于神经退行性疾病如阿尔兹海默病(Alzheimer’s disease,AD)的治疗。乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase,AChE)被认为是AD的重要靶点之一,因此从天然香料植物中探寻有效的AChE抑制剂对于抗AD新药的研发是十分必要的。本论文第一章概述了豆蔻属植物中新颖萜类成分及其生物活性的研究现状与进展。总结了近40年来,从豆蔻属植物中分离鉴定到的52个新颖萜类成分。这些分子具有广泛的生物活性,如抑制NO产生、抗疟疾、抑制核因子NF-κB、抑制α-葡萄糖苷酶等。这将为后续对豆蔻属植物中萜类成分及其生物活性的研究提供科学参考。第二章对产自云南保山草果(Amomum tsaoko Crevost et Lemaire)果实中的化学成分展开系统研究。采用MCI、普通硅胶、反向硅胶(ODS、RP-18)和Sephadex LH-20等柱色谱材料,并结合MPLC、HPLC分析和半制备HPLC等分离技术,从草果果实中共分离鉴定到26个化合物,其中有3个是新化合物。经质谱、核磁共振波谱及紫外、红外等技术鉴定其化学结构,包括1个黄烷醇和单萜杂合体(1),3个黄酮类化合物(2~4),9个单萜类化合物(5~13),3个脂肪族化合物(14~16),2个酚性化合物(17和18)以及8个二苯庚烷类化合物(19~26)。AChE抑制活性测试结果提示化合物1、3、22、23和25是有效的AChE抑制剂,IC50分别为0.17、0.34、0.76、0.14和1.42μM。此外,化合物1和14对H2O2损伤的神经细胞SH-SY5Y显示出神经保护活性。第三章研究了以草果为代表的8种香料植物的挥发性成分及AChE抑制活性。GC-MS分析结果提示挥发油中主要成分为含氧单萜、倍半萜以及苯丙素类化合物。研究结果显示黑/白胡椒(Piper nigrumL)精油、草果(Amomum tsao-ko Crevost et Lemaire)精油、肉桂(Cinnamomum cassia Presl)精油、白豆蔻(A.kravanh Pierre ex Gagnep)精油以及姜黄(Curcuma longa L)精油有显著的AChE抑制活性,IC50分别为8.54、5.02、62.33、38.00、86.00、84.00μg/mL。结合分子对接技术进行体外酶学验证,揭示上述精油中潜在的活性单体。其中3-蒈烯、α-蒎烯和β-蒎烯(IC50分别为1.73、2.66、14.75μg/mL)是香料精油中抑制AChE的主要有效成分。酶动力学分析结果显示3-蒈烯和α-蒎烯为混合型AChE抑制剂,β-蒎烯为非竞争性AChE抑制剂。本论文采用天然产物化学与分子对接相结合的方法,不仅对草果的非挥发性成分开展研究,并对以草果为代表的云南省道地香料植物的挥发性成分开展研究。从草果非挥发性成分中分离鉴定了26个单体化合物,其中3个是新化合物。它们的结构类型有单萜类、二苯庚烷类以及结构较新颖的黄烷醇和单萜杂合体等多种骨架。此外,揭示了以草果为代表的8种云南省道地香料植物的挥发性成分及其抑制AChE活性,并指认和确定了其中3个显著抑制AChE的单体分子。本研究结果为以草果为代表的云南省道地香料植物的可持续利用和开发提供了科学参考和依据。
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