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电化学适配体传感器因其具有独特的优点而受到越来越多研究者的关注,电化学适配体传感器不仅要求简单快速,同时还需要较高的灵敏度。为了提高电化学适配体传感器的灵敏度,本文主要对电极表面修饰进行改善,除此还采取金纳米粒子进行信号放大,构建无标记型电化学传感器应用于有机污染物和生物分子的分析检测。本文主要内容如下: (1)基于多肽适配体、二硫苏糖醇和巯基己醇构建一种无标记三元模式电化学阻抗适配体传感器用于三硝基甲苯的检测。在最优的实验条件下,该传感器检测三硝基甲苯,在0.44 pM-18.92 pM范围内,表面电子转移电阻值(Ret)与三硝基甲苯浓度的对数存在较好的线性关系,检测限为0.15 pM,与由多肽适配体和巯基己醇构建的二元模式传感器相比,由于二硫苏糖醇参与组装可有效消除非特异性吸附从而显著提高检测灵敏度。三元模式传感器具有灵敏度高、检测快速和选择性较好的特点,可用于其他传感器的构建。 (2)以金纳米粒子为载体合成DNA-AuNPs-HRP复合物用于信号放大,构建一种三元模式的电化学适配体传感器可实现对腺苷和溶菌酶的同时检测。电化学适配体传感器的构建过程采用循环伏安和电化学阻抗技术进行表征。以对苯二酚作为信号分子,采用示差脉冲法检测,辣根过氧化酶(HRP)可催化对苯二酚与过氧化氢反应,金纳米粒子有较大的比表面积可富载较多HRP分子,故DNA-AuNPs-HRP能够放大信号,提高灵敏度。在最佳的实验条件下,该传感器检测腺苷的线性范围为0.01 pM-1.41 pM,检测限为0.003 pM,检测溶菌酶在0.01 pg/mL-1.02 pg/mL范围内具有较好的线性关系。该传感器可用于腺苷注射液中腺苷的测定,同时可用于人血清中溶菌酶的测定,结果令人满意。 (3)以金纳米粒子为载体合成AuNPs-DNA3复合物用以信号放大,以邻菲罗啉钌为信号分子构建了检测溶菌酶的电化学发光适配体传感器。首先,捕获探针DNA1通过金硫键固定在金电极表面,溶菌酶适配体DNA2通过与DNA1碱基互补配对连接到电极上。由于AuNPs有较大表面积可以富载更多的DNA3,DNA2又与DNA3部分互补可形成双链结构而结合更多的Ru(phen)32+信号分子从而增强电化学发光信号,提高检测灵敏度。构建的电化学发光适配体传感器检测溶菌酶的线性范围0.02 pg/mL-2 pg/mL,其检测限为0.002 pg/mL,该传感器具有良好的灵敏度和选择性,可实现对血清样品中溶菌酶的检测。