茶树是贵州省重要的经济作物之一,随着茶产业提质增效和茶园的更新换代,优良种苗缺乏已成为目前贵州茶产业发展的瓶颈之一。鸟王茶群体种是都匀毛尖和云雾贡茶的核心种质之一,课题组前期从鸟王茶群体种中选育获得NW32株系,其芽多且饱满,是制作名优茶的理想材料。目前NW32已经在都匀部分地区进行种植示范,为进一步加快推广与缩短育种周期,本研究以茶树资源圃中的鸟王茶NW32的带腋芽为外植体进行离体快繁体系建立,包括消毒条件、腋芽萌发诱导、增殖诱导及壮苗与生根和炼苗与移栽的最佳条件进行探索,以及无菌苗下胚轴、茎段和叶片外植体的离体再生体系建立,包括愈伤组织与芽分化诱导、壮苗诱导、生根诱导的最适条件探索。研究结果如下:（一）鸟王茶NW32离体快繁体系的建立1、将75%酒精的消毒时间（40 s,50 s,60 s）与10%次氯酸钠的消毒时间（10 min,13min,15 min）设计两因素正交试验。在75%酒精浸泡60 s,10%次氯酸钠浸泡13 min条件下消毒效果最好,存活率为66.67%较高,污染率为23.64%较低,且死亡率较低为9.70%。2、在MS培养基中添加不同浓度的6-BA、IBA及GA3进行腋芽萌发诱导培养。在培养基为MS+2.00 mg/L 6-BA+0.80 mg/L IBA+1.00 mg/L GA3进行培养时,腋芽萌发率为95.56%最高,且长势较好。3、在MS培养基中添加不同浓度6-BA、NAA或6-BA、IBA或6-BA、IBA和GA3三种不同组合对腋芽进行增殖诱导培养。最终获得在培养基为MS+3.00 mg/L 6-BA+0.20mg/L IBA+1.00 mg/L GA3培养时,增殖系数为6.59,且植株长势较好。继代增殖培养时,单个外植体芽数为2～3个接种时,增殖系数可达7.49。4、在MS培养基中添加不同浓度6-BA和IBA进行壮苗诱导培养。在培养基为MS+2.00 mg/L 6-BA+0.80 mg/L IBA进行培养时,株高差为2.38 cm、芽苗健壮、且长势较好。5、在接种前用50.00 mg/L IBA无菌溶液浸泡5 min,然后接种至1/2MS培养基中附加不同浓度的IBA进行生根诱导培养。得出在培养基为1/2 MS+1.50 mg/L IBA培养时,生根率达100.00%、根长、侧根较多、且长势较好。6、将炼苗时间（3 d,5 d,7 d）与移栽基质(V营养土=1;V营养土:V珍珠岩=2:1;V营养土:V珍珠岩:V蛭石=2:1:1)设计两因素正交试验。获得炼苗5 d,移栽基质为V营养土:V珍珠岩:V蛭石=2:1:1处理时较好,成活率为90.00%较高。（二）鸟王茶NW32再生体系的建立1、将75%酒精的消毒时间（1 min,2 min,3 min）与20%次氯酸钠的消毒时间（10 min,15 min,20 min）设计两因素正交试验对种子的进行消毒处理。在75%酒精浸泡3 min,20%次氯酸钠浸泡15 min时消毒效果最佳,种胚存活率为85.00%较高,污染率为15.00%较低,死亡率为1.33%。2、在MS培养基中添加不同浓度GA3进行种胚萌发培养。在培养基为MS+1.50 mg/L GA3培养时最好,种胚萌发率86.67%较高。3、在MS培养基中添加不同浓度6-BA、IBA或NAA对无菌苗的下胚轴、茎段和叶片进行愈伤组织及芽分化诱导培养。下胚轴在培养基为MS+4.00 mg/L 6-BA+1.00mg/L IBA培养时较佳,愈伤组织诱导率为95.28%,不定芽分化率为23.33%。茎段和叶片分别在培养基为MS+9.00 mg/L 6-BA+6.00 mg/L IBA和MS+3.00 mg/L 6-BA+9.00mg/L NAA进行愈伤组织诱导最好,诱导率分别为99.33%和96.00%。将附着有不定芽的愈伤组织进行生长培养有利于促进壮苗培养芽苗的成活与生长。4、在MS培养基中附加不同浓度的6-BA和IBA对不定芽进行壮苗培养。在培养基为MS+2.00 mg/L 6-BA+0.80 mg/L IBA培养时最好,株高差为1.57 cm,且长势好。5、将50.00 mg/L IBA无菌溶液浸泡5 min,然后接种至附加有不同浓度IBA的1/2MS培养基中进行生根培养。获得在培养基为1/2 MS+1.50 mg/L IBA进行培养时最好,生根率为87.78%,并且植株的长势好。通过炼苗5 d后,在移栽基质为V营养土:V珍珠岩:V蛭石=2:1:1进行培养时,长势好。