酵母菌是一类微小单细胞真菌,广泛分布在土壤、空气、水生环境、植物表面、动物肠道、皮肤等环境中。青藏高原素有“世界屋脊”和“第三极”之称,高海拔、高落差、低纬度、气候复杂多样,有着丰富多样的生态类型,这不仅促进了该地区生物类群的加速变异与分化,形成了许多适应高原独特环境的特有种,而且也使得青藏高原成为世界生物多样性最为丰富和独特的地区之一。然而,人们对青藏高原地区酵母菌的物种多样性及分布研究报道很少,为了了解青藏高原不同生境中酵母菌群落结构及物种多样性和差异性,我们分析了青藏高原的6个不同地理位置的1200份不同基质样本,共分离得到酵母菌3030株。通过对其形态观察、生理生化实验和分子鉴定确定了这些菌株的分类地位,初步对青藏高原地区酵母菌的物种组成和多样性有了一定了解,进一步分析了高原环境对酵母群落的演替和物种多样性的影响。另外还分离了一些耐高渗、耐高糖的菌株,并分析其物种组成,为以后工业菌种改良和应用提供菌株材料。主要实验结果如下:1.从3030株酵母菌中选取菌落特征有代表性的1695株,测定了这些菌株核糖体r RNA的ITS区域序列,将序列在NCBI数据库中Blast后,根据与模式菌株的相似率和用MEGA7.0软件做近源物种系统发育树分析,推定这1695株酵母菌分布于167个属,410个种,其中子囊菌110种,担子菌300种,另外还有大约20株疑似新种菌株。2.对部分拟新种酵母菌进行了形态学描述和生理生化测试,发现一些菌株的性状与分子鉴定的模式种所描述有一定差异,特别是在温度上,多数菌株只能在30℃下生长,说明青藏高原酵母类种群多数属于耐低温酵母。3.分析青藏高原地区酵母的物种组成、酵母种类分布、生境环境特异性等,结果表明,青藏高原具有显著的酵母多样性,特别是在西藏林芝地区,酵母菌物种数量和种类都占据很高的比例。不同地区样品中酵母菌组成和丰富性不同,但均分离得到Curvibasidium属、Cryptococcus属、Candida属、Aureobasidium属、Cystofilobasidium属、Debaryomyces属、Metschnikowia属、Mrakia属、Naganishia属、Rhodotorula属、Solicoccozyma属;在不同的空间层次上,酵母菌的分布差异也比较大,在相对海拔低的地方,酵母菌多样性和丰度相对高,可能是因为低海拔地方为酵母菌生长提供了一个优越的环境,而以Aureobasidium属、Cystofilobasidium属、Curvibasidium属和Metschnikowia属在高海拔地区广泛分布,这可能与这些酵母菌的嗜冷性有关。西藏地区不同生境下的野生酵母菌群落组成有差异性,嗜冷酵母丰度比较高,多样性也比较高。重要的是,几乎没有发现在所分离得到的酵母菌株中没有任何酵母种类存在地理聚集。此项关于西藏野生可培养酵母多样性研究,为进一步探究我国青藏高原微生物的物种多样性及来源提供一定的数据支持,为以后的开发利用酵母菌种奠定基础。4.在对青藏高原酵母菌多样性分析中发现,有10株左右的菌株分别与目前国内外报道的近源酵母种类有差异,这些菌株在ITS区域与最近模式菌株差异在均在2%以上,因此,我们把这些菌株作为疑似新种处理,并且对其中部分菌株的进行了描述和新物种定义。5.对耐高糖酵母类群类群分析显示,在50%的葡萄糖高糖培养基下,仅有少部分酵母菌株生长。