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辽宁绒山羊是一种“全身皆是宝”的优质白山羊品种,其次级毛囊所产的山羊绒因其质量轻软、御寒保暖、产量稀少等特点更是被喻为“纤维宝石”,其制成衣物后拥有极高的质量评价标准,因此,不断提高羊绒品质和产量具有重要意义。近年来许多研究人员发现,褪黑激素是影响毛囊生长发育和及绒产量和质量的重要因素。
在本实验室前期的研究中,通过RNA测序技术及生物信息学分析,发现了0.2g/L72h的褪黑激素是成纤维细胞的最适生长浓度及时间,并根据GO功能富集和KEGG功能富集分析筛选出了一条差异表达的信号通路—NF-κB信号通路,最终根据该通路中差异表达的毛发生长相关靶基因筛选出所对应的差异表达LncRNA(XLOC_005914),将其命名为LncRNA MTC。据此,利用PCR、构建目的基因过表达及干扰载体等实验技术探究LncRNA MTC对一系列绒毛生长相关基因的表达,并且采用CCK8技术探究LncRNA MTC以及褪黑激素对于辽宁绒山羊皮肤成纤维细胞增殖的影响。本实验的主要研究结果如下:
(1)CCK8结果显示,LncRNA MTC上调和0.2g/L的褪黑激素处理均能明显促进皮肤成纤维细胞增殖,而LncRNA MTC的下调抑制了皮肤成纤维细胞在0.2g/L的褪黑激素作用下的增殖。
(2)在0.2g/L褪黑激素处理的皮肤细胞后,KAP6.2、KAP7.1、KAP11.1、K26、BMPR_IB、LAMTOR3、KAP26.1、KAP8.2基因的表达量发生上调;LncRNA MTC过表达后KAP6.2、KAP7.1、KAP11.1、K26、BMPR_IB、LAMTOR3基因表达上调,而KAP26.1、KAP8.2基因表达下调。
(3)在0.2g/L的褪黑激素处理的皮肤细胞中,干扰LncRNA MTC的表达后,KAP6.2、KAP7.1、KAP11.1、K26、BMPR_IB、LAMTOR3、KAP26.1、KAP8.2基因的表达均下调。
综上所诉,LncRNA MTC不仅能促进皮肤细胞的增殖,而且能调控绒毛生长相关基因的表达。本实验结果说明了LncRNA MTC对绒毛生长相关基因表达的重要影响,探究了其在毛囊发育及绒毛生长过程中发挥的不可忽视的作用,为后续LncRNA MTC作用机制的探究奠定了坚实的基础。
在本实验室前期的研究中,通过RNA测序技术及生物信息学分析,发现了0.2g/L72h的褪黑激素是成纤维细胞的最适生长浓度及时间,并根据GO功能富集和KEGG功能富集分析筛选出了一条差异表达的信号通路—NF-κB信号通路,最终根据该通路中差异表达的毛发生长相关靶基因筛选出所对应的差异表达LncRNA(XLOC_005914),将其命名为LncRNA MTC。据此,利用PCR、构建目的基因过表达及干扰载体等实验技术探究LncRNA MTC对一系列绒毛生长相关基因的表达,并且采用CCK8技术探究LncRNA MTC以及褪黑激素对于辽宁绒山羊皮肤成纤维细胞增殖的影响。本实验的主要研究结果如下:
(1)CCK8结果显示,LncRNA MTC上调和0.2g/L的褪黑激素处理均能明显促进皮肤成纤维细胞增殖,而LncRNA MTC的下调抑制了皮肤成纤维细胞在0.2g/L的褪黑激素作用下的增殖。
(2)在0.2g/L褪黑激素处理的皮肤细胞后,KAP6.2、KAP7.1、KAP11.1、K26、BMPR_IB、LAMTOR3、KAP26.1、KAP8.2基因的表达量发生上调;LncRNA MTC过表达后KAP6.2、KAP7.1、KAP11.1、K26、BMPR_IB、LAMTOR3基因表达上调,而KAP26.1、KAP8.2基因表达下调。
(3)在0.2g/L的褪黑激素处理的皮肤细胞中,干扰LncRNA MTC的表达后,KAP6.2、KAP7.1、KAP11.1、K26、BMPR_IB、LAMTOR3、KAP26.1、KAP8.2基因的表达均下调。
综上所诉,LncRNA MTC不仅能促进皮肤细胞的增殖,而且能调控绒毛生长相关基因的表达。本实验结果说明了LncRNA MTC对绒毛生长相关基因表达的重要影响,探究了其在毛囊发育及绒毛生长过程中发挥的不可忽视的作用,为后续LncRNA MTC作用机制的探究奠定了坚实的基础。