【摘 要】
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目的 基于内质网应激（ERS）蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）-激活转录因子4（ATF4）通路探讨小檗碱减轻高糖诱导的血管平滑肌细胞（VSMC）钙化的相关机制。方法 体外培养大鼠VSMC细胞，分为对照组，高糖组（35 mmol/L葡萄糖）,小檗碱低、中、高剂量组（35 mmol/L葡萄糖+50、100、200μmol/L小檗碱）,小檗碱+pcDNA组（35 mmol/L葡萄糖+200μmol/L
【基金项目】
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河北省2020年度医学研究课题计划项目（20200181）；
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目的 基于内质网应激（ERS）蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）-激活转录因子4（ATF4）通路探讨小檗碱减轻高糖诱导的血管平滑肌细胞（VSMC）钙化的相关机制。方法 体外培养大鼠VSMC细胞，分为对照组，高糖组（35 mmol/L葡萄糖）,小檗碱低、中、高剂量组（35 mmol/L葡萄糖+50、100、200μmol/L小檗碱）,小檗碱+pcDNA组（35 mmol/L葡萄糖+200μmol/L小檗碱+转染pcDNA）,小檗碱+pcDNA-ATF4组（35 mmol/L葡萄糖+200μmol/L小檗碱+转染pcDNA-ATF4）。RT-qPCR法检测ATF4 mRNA表达，甲基百里香酚蓝比色法检测钙水平，磷酸苯二钠法检测ALP活性，Western blot法检测p-PERK、PERK、ATF4、骨桥蛋白（OPN）、Runt相关转录因子2（Runx2）、Osterix蛋白表达。结果 与对照组比较，高糖组VSMC细胞钙水平、ALP活性及细胞中p-PERK/PERK、ATF4、OPN、Runx2、Osterix蛋白表达升高（P＜0.05）;与高糖组比较，小檗碱各剂量组以上指标均降低（P＜0.05）,并呈剂量依赖性；与小檗碱+pcDNA组比较，小檗碱+pcDNA-ATF4组钙水平、ALP活性及细胞中ATF4、OPN、Runx2、Osterix蛋白表达及ATF4 mRNA表达均升高（P＜0.05）。结论 小檗碱能减轻高糖诱导的VSMC细胞钙化，其机制可能与抑制PERK-ATF4通路的激活有关。
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