急性心肌梗死后心肌细胞增殖和再生的初步实验研究

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目的

评估急性心肌梗死后,不同缺血时段心脏不同部位心肌细胞增殖变化,探讨增殖发生时间和部位、分布特点及增殖细胞是否与心脏干细胞有关联及其在修复损伤心肌中的可能作用。

方法

成年SD大鼠64只按随机数字表法分为2组,实验组(n=44)开胸结扎冠状动脉前降支制作急性心肌梗死模型,对照组(n=20)开胸置缝线而不结扎。于术后第3、5、7、14和60 d处死大鼠(第7和14 天两组各9只,其余各组均为5只),采集左心室梗死边缘区及右心室非梗死区心肌组织。处死大鼠前12和24 h分别腹腔注射50 mg/kg 5-溴-2-脱氧尿苷(Brdu)。HE染色观察心肌组织形态学和病理学变化,用免疫组化方法检测Brdu阳性心肌细胞数量;磷钨酸苏木素(PTAH)染色检测新生细胞的横纹结构;α-横纹肌肌动蛋白抗体检测判别增殖的细胞是否为心肌细胞;免疫荧光法测定Brdu和c-kit阳性的心肌细胞。

结果

实验组大鼠急性心肌梗死后第5天梗死边缘区和非梗死区Brdu阳性心肌细胞明显多于对照组(P<0.01);第7天梗死边缘区Brdu阳性心肌细胞达高峰,为对照组的5.7倍[(1.26±0.15)%比(0.22±0.06)%,P<0.01],非梗死区为对照组的4.2倍[(0.75±0.12)% 比 (0.18±0.07)%,P<0.01];第60天两组差异无统计学意义。实验组第7天梗死边缘区的Brdu阳性细胞数量为右心室非梗死区的1.7倍[(1.26±0.15)% 比(0.75±0.12)%,P<0.01],第14天为1.4倍[(0.77±0.09)% 比(0.54±0.11)%,P<0.01]。PTAH染色显示部分增殖的新生细胞有心肌横纹结构。免疫荧光检测显示部分Brdu阳性细胞心肌肌动蛋白标记阳性;梗死边缘区部分Brdu阳性细胞c-kit标记亦阳性,这些心肌细胞核较小且圆。

结论

急性心肌梗死后,成年大鼠新生心肌细胞明显增多,梗死边缘区及右心室非梗死区均显著高于对照组,心肌细胞增殖和(或)再生现象呈时间依赖性。部分新生的心肌细胞具有心脏干细胞特性。本研究表明急性心肌缺血损伤后心肌细胞似有激活增殖和(或)再生的现象。

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