定向克隆相关论文
从重组质粒pIC19R/MC1-tk上切下肿瘤自杀基因单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV1-tk)的cDNA片段(1.7kb),将其定向克隆入逆转录病毒载体pLXS......
采用RT—PCR获得BALB/c小鼠P41基因,并在不影响氨基酸序列前提下,对序列中461ntNcoI酶切位点进行定点突变;然后采用定向克隆方法将狂犬......
[目的]为研究canstatin对动脉粥样硬化斑块的稳定作用,克隆人canstatin基因,并在COS7细胞中表达出具有 生物活性的canstatin。[方......
原核表达并纯化马尔堡病毒(Marburg virus,MARV)糖蛋白(glycoprotein,GP)受体结合域(receptor binding domain,RBD)蛋白,并以此为......
为建立基于重组外膜蛋白A的检测禽源多杀性巴氏杆菌抗体的间接ELISA方法,扩增去除信号肽的外膜蛋白A(outer membrane protein A,Om......
目的:构建真核表达质粒pVAX1-Der p 1,检测质粒编码的重组蛋白在真核细胞293T中的表达,为进一步的动物实验打下基础。方法:分离屋......
目的鼠抗人CD52抗血清的制备与功能鉴定。方法由人Hut-78细胞提取细胞总RNA,运用RT-PCR方法扩增CD52基因,定向克隆入真核表达载体p......
目的构建人肝细胞生长因子(Human hepatocyte growth factor,hHGF)真核表达质粒,并检测其在人骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesen......
细胞因子是调节机体细胞免疫的重要物质。已有实验表明 ,γ 干扰素可明显提高机体抗肿瘤、抗感染的能力。随着分子生物学及分子遗......
目的 环氧合酶 - 2与肿瘤发生的关系已成为肿瘤研究的新热点之一 .本研究旨在获得 h COX- 2编码基因序列 ,构建其正、反义真核表......
1994年Ob基因定向克隆成功,掀开了瘦素研究的序幕。Ob基因位于人类染色体7q31.3,Ob基因编码产物的蛋白分子质量为16kD。瘦素受体有......
多药耐药MDRl基因的过度表达是导致肿瘤细胞产生MDR的重要机制.c-fos基因表达的变化很可能对MDRl基因的表达起着调控作用.为逆转肝......
人肺腺癌细胞系维甲酸特异性cDNA消减文库的建立和鉴定黎伯铨张雪艳蔡岩王秀琴毛宝龄吴采用诱导分化与cDNA文库消减杂交(cDNAli-brarysubtractivehybridization)相结合的策略,建立......
为观察单纯疱疹病毒脱氧胸苷激酶(HSV-TK)/丙氧鸟苷(GCV)基因治疗系统对胃癌细胞的杀伤作用,将HSV-TK cDNA定向克隆入逆转录病毒载体pDO......
0引言her-abl融合基因编码的具有异常蛋白酪氨酸激酶活性的P210蛋白,是导致慢性粒细胞白血病(。hronicmveloidleukemia,CML)发生的主要......
本文拟针对在慢性粒细胞白血病发病中起关键作用的bcrabl 融合基因, 构建特异性的系列核酶载体。为此,我们针对bcrabl 融合位点设计、合成了3 ......
为获取具有生物学活性的p16蛋白,采用定向克隆方法将双酶切克隆质粒pBluescript-p16得到的p16cDNA片段连接到双酶切的原核表达载体pBV220上,转化大肠杆菌TG1得到含重组表......
为克隆人肝癌相关基因,本实验从提取人肝癌细胞总RNA入手,分离其mRNA。以NotI/oligo(dT)12~18为引物合成双链cDNA,除去小于400bp的cDNA片段后,连接EcoRⅠ人工接头,经NotⅠ酶酶切,插入定向......
目的进一步研究bcr/abl融合基因在慢性粒细胞白血病(CML)中作用以及探索CML基因治疗的可能性。方法利用DNA重组技术将所设计、合成的针对bcr/abl融合转录本b3a2断......
目的:为增强肿瘤细胞表面MHCⅠ类分子表达,并调动免疫系统更有效地抑制和杀伤肿瘤细胞,构建在HLA-B7启动子调控下,IRES连接的人TNF......
目的:克隆胃癌的相关基因。方法:提取人胃癌细胞总RNA,分离其mRN。以NatI/oligo(dT)12-18为引物合成双链。cDNA,除去小于400bp的cDNA片段......
目的 探讨RAB5A作为蛋白质入胞信号传导调控者在肿瘤转移中的作用及影响。方法 采用双酶切、定向克隆技术建立了人RAB5A基因真核......
目的旨在构建一种新型的表面蛋白防龋疫苗—DNA防龋疫苗。方法从表面蛋白pac基因上利用BamHI和Sacl双酶切,获得一个3281bp的片段。......
目的构建含单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism,SNP)位点不同碱基的37 kD的N-牙本质基质蛋白1(Dentin matrix protein......
为了进一步研究乙型肝炎病毒(HBV)的s基因变异在免疫逃逸中的作用,我们通过酶切消化质粒载体pEcob6(含双拷贝HBVDNA),得到约900bp的HBV-s基因片断。将其插入到噬菌粒......
目的:将中国人丙型肝炎病毒(HCV)核心基因cDNA克隆到真核细胞表达载体pTM3中,并在HepG2细胞中表达HCV核心蛋白.方法:利用DNA重组技术,将H......
将经过基因修饰的乙肝病毒核心区基因定向克隆于质粒pcDNA3巨细胞病毒启动子下游,构建成真核表达载体,称为pcDNA3-HBV。将pcDNA3-HBV通过多点肌肉注射,给BALB/c小鼠免疫......
对钩端螺旋体病的有效预防亟需广谱、高效、安全、价廉的疫苗。为了获得重组表达的钩体内鞭毛亚单位蛋白抗原,以探讨制备新疫苗的途......
磷酸丙糖异构酶(TPI)是已被公认的血吸虫病疫苗候选分子之一,本研究将日本血吸虫中国大陆株TPI分子基因DNA片段定向克隆到表达载体pGEX-4T-3(编码26kDa的GST蛋白)中......
1994年Zhang等人通过定向克隆技术首次发现了ob基因和该基因编码的蛋白产物—瘦素,瘦素的发现给肥胖及能量代谢领域带来了一次重......
瘦素是由肥胖基因(ob基因)编码的一种由167个氨基酸组成的分泌型蛋白质,于1994年由Zhang等[1]应用定向克隆法从肥胖与糖耐量异常的......
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以质粒(sSVLD3)为模板,通过聚合酶链反应(PCR)扩增得到一条139bp的片段,它含有丁型肝炎病毒(HDV)基因组RNA中核酶(ribozyme)区的cDNA,该核酶具有自身裂解功能,将上述片段插入到pGEM-3Z中......
用PCR产物进行克隆已广泛用于分子生物学的各个领域。PCR产物的克隆主要通过两个途径:其一,在引物的3’末端加上限制性内切酶的识别序列,使扩......
GAP┐43cDNA及TH┐3cDNA重组逆转录病毒载体的构建ConstructionoftheGAP┐43cDNAandTH┐3cDNArecombinantretrovi┐ralvectors刘俊**蔡文琴***杨辉张可成(第三军医大学附属新桥医...
GAP┐43cDNA and TH┐3cDNA recombinant......
目的 :为设计研制安全有效的人脑型疟疫苗提供进一步科学依据。方法 :应用多聚酶链反应 ( PCR)技术对中国 5例脑型疟患者恶性疟原......